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第13章 实验10 实验室环境中微生物的检测

实验目的

(1)证明实验室内存在多种微生物,观察不同类型微生物的菌落特征。

(2)强调微生物实验的无菌操作技术的重要性。

实验原理

微生物的基本特点是在自然界分布广泛,实验室内也不例外。由于其个体微小、结构简单,绝大多数用肉眼看不到,因此,只有通过微生物细胞在营养琼脂培养基上适宜温度下培养,大量繁殖形成微生物细胞群体,即菌落,才能用肉眼直观可见。

实验材料

(一)培养基

灭菌的牛肉膏蛋白胨营养琼脂平板(培养基4)。

(二)试剂

0.85%灭菌生理盐水。

(三)仪器与其他用具

灭菌棉签、镊子、剪刀、灭菌牙签、记号笔、灭菌平皿等。

实验流程

制备平板→空气检验→尘土检验→自来水检验→人体检验→适温培养

实验步骤

以2人为一组,取5个已倒好灭菌营养琼脂的平板,其中1个作为对照不要开盖,其余每人2个平板,组员分别选择下列处理方法。

(一)空气检验

打开培养基皿盖,在空气中暴露10~15min,然后盖上皿盖。

(二)尘土检验

用灭菌棉签先蘸一下灭菌生理盐水,而后在实验台(或凳子)上擦两下,打开皿盖,在培养基表面轻轻滚动涂抹,然后盖上皿盖。注意不要将培养基擦破。

(三)自来水检验

用灭菌棉签蘸少量自来水,打开皿盖点接种于培养基表面,注意不要将培养基划破,然后盖上皿盖。

(四)人体微生物检验

以下三种方法任选一种。

(1)打开培养基皿盖 用手指触摸培养基表面几个点,注意不要将培养基戳破,然后盖上皿盖。

(2)用剪刀取自己的头发(约5cm长)3~5根,打开皿盖,用镊子将头发放于培养基表面,注意头发要贴在培养基表面,然后盖上皿盖。

(3)用灭菌牙签取少量牙垢,打开皿盖涂于培养基表面,注意不要将培养基划破,然后盖上皿盖。

(五)培养

在小皿盖上用记号笔写明班级、姓名、日期及处理方法。将营养琼脂平板倒置于37℃温箱培养48h后,观察结果。

实验注意事项:(二)~(四)步骤的实验内容必须依据无菌操作要求完成。

实验结果与报告

思考题

(1)实验结果说明了什么问题?

(2)微生物实验的无菌操作有何意义?

(3)比较不同来源的样品,哪一种样品的平板菌落数与菌落类型最多?

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