一、常规生化反应试验用试剂
1.吲哚（靛基质）试剂（用于吲哚试验）
制法一：将5g对二甲基氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇（正、异戊醇均可）中，而后缓慢加入浓盐酸25mL。溶液呈土黄色。
制法二：将1g对二甲基氨基苯甲醛溶解于95mL 95%乙醇中，而后缓慢加入浓盐酸20mL。
2.5%α-萘酚无水乙醇溶液（用于V-P试验）
称取5gα-萘酚，用无水乙醇定容至100mL，保存于棕色瓶中。该试剂易氧化，临用时现配。
3.4 0%KOH溶液（用于V-P试验）
称取40gKOH，用蒸馏水溶解定容至100mL。
4.格里斯试剂（用于硝酸盐还原试验）
A液：对氨基苯磺酸0.5g，溶于100%稀醋酸150mL中，保存于棕色瓶中。
B液：α-萘胺0.5g，溶于10%稀醋酸150mL中，加蒸馏水20mL，保存于棕色瓶中。
临用时，A液和B液等量混合，但此液不能较长时间保存。
5.二苯胺试剂（用于硝酸盐还原试验）
称取二苯胺0.5g溶于100mL浓硫酸中，再将此溶液徐徐倒入20mL蒸馏水中，保存于棕色瓶中。
6.1 0%FeCl3溶液（用于苯丙氨酸脱氨酶试验）
称取FeCl3？6H2O 10g，溶于蒸馏水中，定容至100mL。
7.过氧化氨酶试剂（用于过氧化氢酶试验）
3%过氧化氢溶液，临用时配制。
8.氧化酶试剂（用于氧化酶试验）
（1）1%盐酸二甲基对苯二胺或盐酸四甲基对苯二胺试剂 称取盐酸二甲基对苯二胺或盐酸四甲基对苯二胺0.5g，溶于50mL蒸馏水中即可。此试剂少量新鲜配制，于密闭棕色瓶内避光保存。如置于冰箱内冷藏，可在配制后7d内使用。原液无色，变色后不能使用。
（2）1%α-萘―水乙醇溶液 称取α-萘酚1g，用无水乙醇定容至100mL，保存于棕色瓶中，临用时现配。
二、指示剂
9.甲基红指示剂（用于甲基红试验）
成分：甲基红（methyl red）0.04g，95%乙醇60mL，蒸馏水40mL。
制法：先将甲基红溶于95%乙醇中，然后加入蒸馏水。变色范围pH4.2～6.3，由红变黄。
10.溴甲酚紫指示剂（用于配制培养基）
（1）1.6%溴甲酚紫乙醇（BCP）溶液
成分：溴甲酚紫1.6g，95%乙醇50mL，蒸馏水50mL。
制法：精确称取溴甲酚紫1.6g，溶于50mL酒精（95%）中，再加入蒸馏水50mL，过滤后使用。按相同方法，可以配制1.6%溴甲酚绿（BCG）或溴麝香草酚蓝（BTB）乙醇指示剂。
（2）0.04%溴甲酚紫水溶液
成分：溴甲酚紫0.04g，0.01mol/LNaOH7.4mL，蒸馏水92.6mL。
制法：精确称取溴甲酚紫0.04g，溶于0.01mol/L NaOH7.4mL中，然后加入蒸馏水92.6mL，过滤。溴甲酚紫变色范围：pH6.8～5.2，颜色由紫变黄，常用浓度为0.04%。
11.溴麝香草酚蓝指示剂（用于配制培养基）
（1）1%溴麝香草酚蓝乙醇溶液
成分：溴麝香草酚蓝10g，95%乙醇50mL，蒸馏水50mL。
制法：精确称取溴麝香草酚蓝10g，溶于50mL酒精（95%）中，再加入蒸馏水50mL，过滤。
（2）0.2%溴麝香草酚蓝水溶液
成分：溴麝香草酚蓝0.2g，0.01mol/L NaOH6.4mL，蒸馏水93.6mL。
制法：精确称取溴麝香草酚蓝0.2g，溶于0.01mol/L NaOH6.4mL中，然后加入蒸馏水93.6mL，过滤。溴麝香草酚蓝变色范围：pH6.0～7.6，颜色由绿变蓝，常用浓度为0.2%。
12.石蕊指示剂（用于配制培养基）
（1）1%～2%石蕊乙醇溶液
成分：石蕊颗粒8.0g，40%乙醇300mL。
制法：先将石蕊颗粒研碎，然后倒入有一半体积的40%乙醇溶液中，加热1min，倒出上层清液，再加入另一半体积的40%乙醇溶液，再加热1min，倒出上层清液，将两部分溶液合并，过滤。如果总体积不足300mL，可添加40%乙醇，最后加入0.1mol/L HCl溶液，搅拌，使溶液呈紫红色。
（2）2.5%石蕊水溶液 称取石蕊2.5g溶解于100mL蒸馏水中，过滤后使用。变色范围：pH5.0～8.0，颜色由红色变蓝色。
13.0.0 4%中性红指示剂
称取中性红0.1g，溶于70mL95%乙醇中，蒸馏水定容至250mL。变色范围：pH6.8～8.0，颜色由红变黄。
14.0.5%酚酞指示剂
称取酚酞0.5g，溶解于100mL50%或60%的乙醇溶液中。变色范围：pH8.2～10.0，颜色由无色变红色。
15.0.0 2%酚红指示剂
称取酚红0.1g，加28.2mL 0.01moI/L NaOH，加蒸馏水定容至500mL。变色范围：pH6.8～8.4，颜色由黄色变红色。
16.0.0 4%甲基橙指示剂
称取0.1g甲基橙，加3mL 0.1mol/L NaOH，加蒸馏水至250mL，变色范围：pH3.1～4.4，颜色由红色变橙色。
17.美蓝氧化还原指示剂
0.006 mol/L NaOH，0.015%美蓝溶液，6%葡萄糖溶液。使用时将三种溶液等量混合，加热使美蓝褪色，迅速置于厌氧罐中。如溶液无色或淡蓝色，即为厌氧环境。
三、其他试剂
18.0.8 5%生理盐水（用于制备菌悬液或孢子悬液及检样稀释液）
氯化钠8.5g，蒸馏水1000mL，氯化钠溶解后，分装三角瓶225mL，试管9mL，0.1MPa高压灭菌15min。
19.0.5%盐水（用于稀释血清，检验致病性大肠杆菌用）
氯化钠0.5g，蒸馏水100mL，氯化钠溶解后，分装于三角瓶中，0.1MPa高压灭菌15min。
20.0.1 mol/L pH7.0磷酸盐缓冲液（用于化学诱变制备菌悬液）
K2HPO4相对分子质量=174.18，0.1mol/L溶液为17.4g/L，称取17.4g K2HPO4溶解于蒸馏水中，定容至1000mL。
KH2PO4相对分子质量=136.09，0.1mol/L溶液为13.6g/L，称取13.6g KH2PO4，溶解于蒸馏水中，定容至1000mL。
将0.1mol/L K2HPO4 61.5mL与0.1mol/L KH2PO4 38.5mL混合，即为0.1mol/L pH7.0磷酸盐缓冲液。
21.0.1 mol/L CaCl2溶液
称取0.736g氯化钙（CaCl2？2H2O），加蒸馏水使之溶解，并定容至50mL，0.1MPa灭菌15min，4℃冰箱保存。
22.Ringer氏溶液（25%，用作稀释液和悬浮液）
成分：氯化钠2.25g，氯化钾0.105g，水合氯化钙0.12g，碳酸氢钠0.05g，蒸馏水1L。
制法：将上述盐溶解于1L蒸馏水中，分装，121℃灭菌20min。
23.0.1%蛋白胨水稀释剂（用于稀释食品中的嗜冷菌）
成分：蛋白胨1g，蒸馏水1000mL，pH7.0.
制法：溶解蛋白胨于蒸馏水中，校正pH，0.1MPa灭菌15min。
24.亚硝基胍诱变用试剂
（1）亚硝基胍（NTG）溶液 在通风橱中称取25mg NTG于棕色瓶中，加2.5mL丙酮使其溶解，溶解后加水10mL，配制成2.5mg/mL NTG溶液。
（2）丙―酸盐缓冲溶液K2HPO4 150g/L，丙酮200mL/L。
（3）FeSO4溶液FeSO4？7H2O 50g/L，H2SO4 10g/L。
（4）酒石酸钾―水溶液NH3？H2O 300mL/L，酒石酸钾钠375g/L。
（5）丁二酮标准溶液 称取500.0mg丁二酮，溶于1000mL双蒸水中，用棕色瓶储于冰箱内，临用前吸取5.00mL，稀释成1000mL，浓度为0.25mg/mL。
