登陆注册
6490200000037

第37章 附录2 常用显微化学鉴定及试剂的配制

(一)碘—硫酸法

植物细胞的细胞壁的主要成分是纤维素,纤维素由于硫酸和碘的作用,呈蓝色反应。

方法是将1%碘液滴于要测定的材料上,然后加一滴66.5%硫酸。纤维素被硫酸水解后,遇碘则呈蓝色反应。已木质化的细胞壁,因木质素的掩盖,不能与纤维素发生作用,因此细胞壁不呈蓝色反应。

试剂配制方法:

1%碘液:将1.5 g碘化钾溶于100 mL的蒸馏水中,待完全溶解后,加入1 g碘,振荡溶解。66.5%硫酸:7份浓硫酸加入3份蒸馏水配制而成。配制时要使浓硫酸慢慢地加入水中,并不断地用玻璃棒搅拌,否则会因急剧发热而使容器炸裂。

(二)苏丹 Ⅲ反应

苏丹 Ⅲ可将细胞中脂肪、栓质、角质染为橘红色。因此,可用此染料显示上述物质在细胞中的分布和位置。其配制方法是:将苏丹 Ⅲ(或苏丹 Ⅳ)染料0.1 g,溶于10 mL 95%酒精中,然后加入10 mL甘油。

(三)间苯三酚反应法

间苯三酚的反应是植物显微化学中确定木质化细胞壁的最常用和最简单的方法。这一反应是当间苯三酚与细胞壁中木质素相遇时,发生樱桃红色或紫红色反应。其方法是所要鉴定的切片先用一滴1 mol/L盐酸浸透(间苯三酚要在酸性环境下才能与木质素起作用),然后滴一滴5%~10%间苯三酚的95%酒精溶液,木质化的细胞壁即发生颜色反应。

(四)碘液测试淀粉法

淀粉遇碘呈蓝色反应,它是测定淀粉的最常用方法。碘液配制方法是:2 g碘化钾放入5 mL蒸馏水中,加热使其完全溶解。然后加入1 g碘,完全溶解后用蒸馏水稀释至300 mL,放入具有毛玻璃塞的棕色玻璃瓶中,置于暗处保存。

测定淀粉时,可将上述溶液稀释2~10倍,这样染色不致过深,效果更好。

(五)压片法常用的染料

1.醋酸洋红

为压片法中最常用的染料。配制方法是:先将100 mL 45%醋酸水溶液于烧瓶中煮沸,移去火焰,停止加热。然后缓慢加入1 g洋红粉末,全部加入后再煮沸1~2分钟。此时可将一枚生锈铁钉用棉线悬入溶液中约1分钟后取出(铁为媒染剂)。静置12小时后经过过滤,放入磨口玻璃塞棕色瓶中保存备用。

2.石炭酸—品红

为近年创用的一种优良核染色剂,将细胞核和染色体染为红紫色,胞质一般不着色,背景清晰。其配制方法有二:

配方Ⅰ:

原液A:取3 g碱性品红溶于100 mL的70%酒精中(此液体可长期保存)。

原液B:取10 mL原液A,加入90 mL的5%的石炭酸(酚)水溶液中(可保存两周)。

染色液:取55 mL原液B加6 mL冰醋酸和6 mL的37%甲醛。

此染色液因含有较多的甲醛,可使原生质体硬化,而能保持其固有的形态。但也因此不易使组织软化,因而不太适用于植物组织的染色体压片染色(本染色液适于植物原生质体培养中使用)。在此基础上加以改进的配方 Ⅱ,则可普遍地用于一般植物组织的染色体压片的染色。

配方 Ⅱ:

取配方Ⅰ中的染色液20 mL加80 mL 45%醋酸和1.8 g山梨醇。

染色液配制后为淡品红色,如立即使用染色较浅。放置2周后,染色能力显著增强,而且放置时间越久,染色效果越好。

(六)铬酸—硝酸离析法

为了观察一个细胞完整的立体形态结构,可以用一些化学药品把细胞壁中的中层物质(果胶质)溶解,使细胞分离散开,便于观察。离析前先把材料洗净,用刀切成1~2 mm宽的狭条(如叶片)或切成火柴棍粗细的长约1 cm小条(如根或茎)。当然也要考虑观察的对象,如要观察木质部的组成分子,则可把根或茎的外面树皮剥去,再切成小条。切好后的材料放进小玻璃瓶中,然后加入离析液,加入量约为材料的20倍。塞紧瓶塞,放于30℃~40℃温箱中。浸渍时间因材料性质而异,一些叶片或幼嫩的根和茎组织,3~4小时即可,而有些次生结构(如木质部)则需要更长的时间,离析情况应随时检查。检查的方法是取少许离析材料,放在载玻片上,加一滴水,加上盖玻片。然后用解剖针尖端轻轻敲打,如果材料分离则表明浸渍时间已够。浸渍时间超过一天以上时,应更换离析液一次。离析时间已够的材料,用水洗净后放入50%或70%酒精中保存。

离析液配方:

10%铬酸1份,10%硝酸1份,两种溶液应在使用时才混合,混合均匀后再使用。

同类推荐
  • 千姿百态的海洋生物

    千姿百态的海洋生物

    每当我们在岸边捡着浪潮送来的贝壳,望着一望无际,时而波涛汹涌,时而风平浪静的海洋的时候,总是在想蔚蓝色的海水下,到底生活着哪些生物?是否有高度文明的“海底人”?又是否真有美人鱼?提到“一闪一闪”、“灿烂的光芒”这些词时,我们会想到晴朗的夜空,眨眼的星星。其实在海底也会有这种现象,海底的鱼也会常常发出灿烂的光芒,这又是怎么一回事昵?众多的海洋之谜,等待我们来揭开。因此,我们要不断向前,勇敢攀登科学高峰。
  • 地理:地球的全面堪测

    地理:地球的全面堪测

    本书内容包括:《难以走出的死亡谷》、《地震中的奇闻》、《神秘的蝮蛇岛》、《各地的奇异怪坡》、《可怕的厄尔尼诺现象》、《大自然管弦乐队》、《世界上能杀人的湖》等。
  • 地理探究

    地理探究

    本书主要指地学历史与地理科技。包括先秦两汉时期的地理学成就;魏晋南北朝时期的地理学成就;唐宋时期的地理学成就;元明时期的地理学成就;清代地理学成就;《中国古代地理学》(地理科技历史、石器时代地理知识、夏、商时期地理知识、周代地理知识、先秦测量和地图记载马王堆汉墓出土地图、僧一行及其子午线测量、贾耽及《海内华夷图》宋元舆图张骞、班超通西域等)。
  • 珍宝:天然珍珠宝石

    珍宝:天然珍珠宝石

    本书介绍了钻石、红宝石、蓝宝石、祖母绿、绿松石、碧玺、雨花石、翡翠、孔雀石、青金石、玛瑙、猫眼石等。
  • 文明解密

    文明解密

    《我的第一本探索书
热门推荐
  • 吸血鬼与猫妖姬

    吸血鬼与猫妖姬

    她,她,她居然杀了一只吸血鬼!吓得她只剩下半条命了!好不容易死里逃生,大半夜的又被小女鬼邀请来聊聊天,帮帮忙!天哪!天哪!还会发生什么事情呢?这又到底是怎么回事啊?哼!一定是他们在捣鬼! 呵呵!居然让她见着了始作俑者。一定要找他们给自己讨个公道!可是,小姐呀!你有没有想过呀!那两个可是妖怪啊!
  • 大神师傅快束手就擒

    大神师傅快束手就擒

    她是个大大咧咧不着边际的女汉子,打架斗殴,出口成脏是她的坏习惯。他是个外冷内热的冷阔少,他总给人不正经玩世不恭的状态,他泡吧喝酒夜夜笙歌。第一次见到他,她对他一见钟情,在他身边,她为他改变,是他的小女人!两个世界的人因为游戏走到了一起,擦出爱的火花
  • 帝泽山河

    帝泽山河

    上古时期,神魔纷乱。九州大陆,万族林立。一个王朝在乱世中崛起,与群雄博弈,与天命作斗争,然而,这并非开始。故事始于一位少年,一个被流放的贵族。自他懂事起,便过着颠沛流离的逃亡生活,直到有天目睹亲人被害,少年从此立志要成为强者,并踏上了一条复仇的不归路。古老的神话缓缓开启,天地的枷锁正在持续崩塌,人世间的悲欢离合,仙道路上的尔虞我诈,不一样的仙侠,不一样的东方传奇,一切皆在帝泽山河!
  • 大款老公来逼婚:做我老婆一天

    大款老公来逼婚:做我老婆一天

    “娶我只要九块钱,可是睡我……却是一夜百万,你说,我会不会嫁给你?”她讽笑又带有挑衅的望着他,而他却挑起她尖润的下巴,说,“你嫁或不嫁,戒指都已戴在你手上,请贴也发了,新闻也报了。我的女人标签已经贴上。顺便附一句,嫁给我,我让你免费睡……”
  • 狼可汗传

    狼可汗传

    一个未来世界公认的废物少年,为了寻找人类进化危机的原因,穿越回到战国。依靠自身的武力,智慧和运气,数次化险为夷,军商匪匠无所不交,逐渐走向人生的巅峰,最终成就一代传奇。
  • 医女驭憨夫

    医女驭憨夫

    作为现代中医界的奇才兼吃货,只不过急赶着去马路对面买限量的灌汤包,就很杯具被一辆蓝博基尼撞到,醒来时,居然成了一个十三岁的脸上长满疙瘩的哑女,那谁谁谁可以告诉我这是什么情况,这就是传说中的茅草屋么?屋里除了躺在身下的这张床,就一个像凳子的木墩,上面摆着一个黑漆漆的碗,碗里只有半碗水……
  • 妖道天蚕

    妖道天蚕

    因为孙悟空偷蟠桃而生的两只小妖怪,出家做了道士,成为了真正的“妖道”!但之后发生的事让我们分不清孙悟空到底是我们的恩人,还是我们的仇人!
  • 绝恋异世

    绝恋异世

    她,18岁就等上了世界杀手排名榜的NO.1,却因背叛组织而被组织灭口,她,世家嫡女,绝世废材,温柔娴静,胆小懦弱,欺凌而死她,倾城绝色,冷漠狠辣,绝顶异能,随性而活,异世重生再次睁眼,灵魂转换,异世重生,她,不再是人人可欺的废材嫡女,害她之人,她,必将百倍奉还,挫骨扬灰,永生不得安宁,在这个以实力为天的世界上,且看她如何威慑天下,看遍天下美男,带领她的魔兽大军横纵三界。
  • 嘘,爱让我先说

    嘘,爱让我先说

    一失足成千古恨!穆穆二十几年来,踏实老实地生活,不过就是在年幼无知的时候,犯了一个青春少女都会犯的错误——暗恋沈澈吗。沈澈,计算机系风云学长,笑容温和,树一样安静的美男子……起因嘛,很Q很心动。过程嘛,很萌很惊心。结果嘛,很惨很受伤……没想到他竟然外表衣冠禽兽,内里禽兽衣冠,她错了还不成吗?可是,就连重刑犯都有改过自新的机会啊,已然决心珍爱生命远离渣男的她,怎么就没法脱身了呢!对她悲愤的哀号,沈澈邪佞地抚摸着她的冲冠怒发说:“谁让我是渣男呢?”
  • 灵异史记

    灵异史记

    我不想过多的去描述,因为我怕吓到了你,如果你不怕就进来吧!