因发明分配色谱法而荣获1952年诺贝尔化学奖
阿切尔·约翰·波特·马丁
阿切尔·约翰·波特·马丁(英国,1910~2002年),1910年3月1日生于伦敦,1932年毕业于剑桥大学后留任该校营养学研究所工作。在此期间,马丁开始从事食物营养成分分析,并于1934年发表《维生素E的吸收光谱》,其中阐述了维生素E的结构和特性。1936年,马丁获博士学位。1938年至1973年,马丁先后就职于英国羊毛工业研究协会、诺丁汉布茨纯药物公司、英国国家医学研究所、阿波特实验室。1974年至1979年任美国休斯顿大学化学教授。
1940年,马丁与辛格合作发明了分配色层分离法(即分配色谱法)。分配色谱法用于分离氨基酸混合物中的各种蛋白质结构的组分以及分离类胡萝卜素等,该法操作简便、试样用量少,可用于分离性质相似的物质以及蛋白质的研究,是生物化学和分子生物学的基本研究方法。
他们在分配色层分离法的基础上,还发明了“气-液”色层分离法、纸层分离法和纸层色谱法,这些方法不仅可以分离出许多新物质,而且也便于研究生物体内的代谢,这在分析方法上是一次重大革命。马丁和辛格也因此于1952年共获诺贝尔化学奖。
此外,马丁还发明了利用电泳和纸色谱鉴别小分子多肽以及利用不同的吸附物质来分离气体的气相色谱法,这些都广泛用于各种有机化合物的分离和分析。
密灵顿·辛格
密灵顿·辛格(英国,1914~1994年),1914年10月28日生于英国利物浦,1928年进入曼彻斯特技工学院学习,后转入剑桥大学三一学院,1941年获博士学位。1941年至1967年先后任职于利兹羊毛工业研究所、伦敦利斯特预防医学研究所、阿伯丁罗威特研究所,1967年在诺里奇食品研究所任职直至离休。
辛格主要致力于用理化方法对蛋白质及相关物质的离析研究。1939年,辛格开始深入探索生物化学中的各种难题。他虽然成功分离出乙酰氨基酸衍生物,但辛格发现,如果没有有效的分离和纯化物质的手段以及有效的实验方法是难以实现有机物的分离的。在此以前,人们一直采用效率较低的重结晶、升华、蒸馏等方法来鉴别和提纯混合物组分,其步骤烦琐,误差较大。1906年,俄国植物学家兹维脱首先发明色谱法,并用该法从植物叶片中提取叶绿素a、叶绿素b和叶黄素等。辛格深受启发,他采用此法实现了羊毛水解产物中的氨基酸的成功分离。
此后两年,他采用新型吸附材料,改进马丁的逆流提取器和操作方法,然后让将氨基酸混合溶液通过填有硅胶的逆流提取器的吸附柱,再用氯仿冲洗,由于氨基酸衍生物在水和氯仿中溶解度不同,因此能成功分离出各种氨基酸。该法虽在操作形式上与兹维脱的色谱法相似,但分离原理完全不同,此法后称“分配色谱法”。
1943年,辛格开始研究抗菌缩氨酸。1944年,辛格用滤纸代替硅胶实现了多种氨基酸的成功分离。辛格将这一用纸分离物质的方法称为“纸色谱法”。该法不仅可分离氨基酸,还可分离和检验糖、肽类、各种抗菌素以及几乎所有的无机物、有机物。后继者将这种方法发展成为化学领域中一项非常重要的实验手段和生产技术。1948年,辛格用纸色谱法精确测定出短杆菌肽的分子结构。短杆菌肽虽然是一种比较简单的蛋白质物质——或称肽类化合物,但它与后来导致辛格测定出胰岛素的复杂结构有直接的关系。