登陆注册
6035600000013

第13章 行之有效的手段——基因克隆

1.基因克隆的过程

基因克隆是20世纪70年代发展起来的一项具有革命性的研究技术,可概括为:分、切、连、转、选。“分”是指分离制备合格的待操作的DNA,包括作为运载体的DNA和欲克隆的目的DNA;“切”是指用序列特异的限制性内切酶分割载体DNA,或者分离目的基因;“连”是指用DNA连接酶将目的DNA同载体DNA连接起来,形成重组的DNA分子;“转”是指通过特殊的方法将重组的DNA分子送入宿主细胞中进行复制和扩增;“选”则是从宿主群体中挑选出携带有重组DNA分子的个体。

一般来说,基因克隆技术包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接,构建成新的重组DNA,然后送入受体生物中去表达,从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。因此基因克隆技术又有分子克隆、基因的无性繁殖、基因操作、重组DNA技术以及基因工程等多种称呼。

2.基因克隆的常用方法

基因是遗传物质的最基本单位,也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能,还是要改变某个基因的功能,都必须首先将要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。下面就基因克隆的几种常用方法进行详细的介绍。

(1)根据已知序列克隆基因

对已知序列的基因克隆是基因克隆方法中最为简便的一种。获取基因序列多从文献中查取,即将别人发现的基因序列直接作为自己克隆的依据。同时,根据蛋白质序列可以将编码该蛋白质的基因扩增出来。在基因文库中注册的蛋白质序列都可以找到相应的DNA或cDNA序列。

(2)根据已知探针克隆基因

这是基因克隆的一种比较常用方法。首先将探针作放射性或非放射性标记,再将其与经过不同内切酶处理的基因组DNA杂交,最后将所识别的片段切下来,克隆到特定的载体(质粒、噬菌体或病毒)中作序列测定或功能分析。这种方法不但可以将基因克隆出来,还能同时观察该基因在基因组中的拷贝数。

(3)未知序列的基因打靶

根据已知序列进行基因克隆,多数是重复别人的工作,或者是在别人工作的基础上继续自己的工作,因而不存在新基因的克隆过程。对未知序列的基因克隆才是真正的创造性研究。

同类推荐
  • 海洋馆漫游:海洋知识浏览

    海洋馆漫游:海洋知识浏览

    海洋是一个富饶而未充分开发的自然资源宝库。海洋自然资源包括海域(海洋空间)资源、海洋生物资源、海洋能源、海洋矿产资源、海洋旅游资源、海水资源等。这一切都等待着我们去发现、去开采。青少年认真学习海洋知识,不仅能为未来开发海洋及早储备知识,还能海洋研究事业做出应有的贡献。
  • 神奇生理科学美图大观

    神奇生理科学美图大观

    针对广大读者的好奇心理和探索心理,全面编撰了世界上存在的各种奥秘未解现象和最新探索发展,具有很强的系统性、知识性和神秘性,能够启迪读者思考、增长知识和开阔视野,能够激发读者关心世界和热爱科学,能够培养读者的探索和创新精神。
  • 海洋解密百科(奥秘世界百科)

    海洋解密百科(奥秘世界百科)

    本套书全面而系统地介绍了当今世界各种各样的奥秘现象及其科学探索,集知识性、趣味性、新奇性、疑问性与科学性于一体,深入浅出,生动可读,通俗易懂,目的是使读者在兴味盎然地领略世界奥秘现象的同时,能够加深思考,启迪智慧,开阔视野,增加知识,能够正确了解和认识这个世界,激发求知的欲望和探索的精神,激起热爱科学和追求科学的热情,掌握开启人类和自然的金钥匙,使我们真正成为人类和自然的主人,不断认识世界,不断改造自然,不断推进人类文明向前发展。
  • 开发地球最后的处女地(科普知识大博览)

    开发地球最后的处女地(科普知识大博览)

    要想成为一个有科学头脑的现代人,就要对你在这个世界上所见到的事物都问个“为什么”!科学的发展往往就始于那么一点点小小的好奇心。本丛书带你进行一次穿越时空的旅行,通过这次旅行,你将了解这些伟大的发明、发现的诞生过程,以及这些辉煌成果背后科学家刻苦钻研的惊心时刻。
  • 科学未解之谜

    科学未解之谜

    科学是人类在长期的实践活动中对自然界和客观世界的认识和改造世界的理论,它是人类进化演变到一定阶段的产物。按照严格的定义,科学是运用范畴、定理、定律等思维形式反映现实世界各种现象的本质和规律的知识体系,是人类意识形态之一。科学是人类永无止境地探索、实践,阶段性地趋于接近真理的活动,是一项成果的绝大部分有利于造福人类社会的高尚事业。如今,科学广泛地被运用于各个领域当中,影响到人们生产和生活的方方面面。
热门推荐
  • 从荒野求生开始

    从荒野求生开始

    这是一个现代人的灵魂穿越到未来,凭借自己对古代历史的了解在游戏中打拼的故事。(签约作品,放心收藏)
  • Mudfog and Other Sketches

    Mudfog and Other Sketches

    本书为公版书,为不受著作权法限制的作家、艺术家及其它人士发布的作品,供广大读者阅读交流。
  • 不知爱将至

    不知爱将至

    他在米晴心里,爱情是百分百的纯粹,不妥协也不将就,而她不妥协的下场,就是瞬间从云端跌至尘埃里,在她灰头土脸的时候,偏偏又遇到了毫无同情心的“希望之光”肖顾。在米晴眼里,没有什么困难是她的“人格魅力”解决不了的,如果有,就是她小气的房东。在肖顾眼里,没有什么困难是他的智商解决不了的,如果有,那就是他爱偷吃东西的房客。
  • 撒旦索情:至死不休

    撒旦索情:至死不休

    《oneday》里安妮海瑟薇说的一句台词。“我无法控制自己对你的难以忘怀,可是我关于你的一切已经再也没有了期待。”她——夏语儿,不得已的嫁给了全身烧伤的凌家大公子,却爱上了一直招惹自己的天姿财团boss顾北天!在现实和理智的压迫下几近疯狂的她却发现了一个惊天大秘密!爱情里面不应该有隐瞒,不应该有欺骗,她说“如果,遇见你,是我的不幸,那么,爱上你,就是我这辈子最大的不幸!”
  • 忠魂正气:颜真卿传

    忠魂正气:颜真卿传

    这是一部充满激情、读来让人热血沸腾的人物传记。作者以深情而激昂的笔触,将经历了大唐四帝,经历了朝廷由盛转衰等多个历史变节的颜真卿的一生,娓娓道来。作品紧紧围绕他在宦海沉浮和平叛战乱中的激烈冲突,重点突出了颜真卿的忠烈和贞节,塑造了一位忧国忧民、刚正不阿、清正廉洁的忠臣名士的形象。同时,作品还对颜真卿的书法艺术进行了充分的展示,将他的伟大人格和崇高的精神境界与书法成就的取得,进行了历史性的还原。作者对颜真卿的生平有过全面具体的了解,更在创作中融入了小说的比喻、比拟等写作手法,平添生动趣味。
  • 重生都市之极品高手

    重生都市之极品高手

    系统:昨天晚上,那个校花?林超:我不是那样的人。系统:那前天你老师……林超:请注意你的言行,作为一个系统的本分……系统:卧槽!这么说是那个小护士?林超:尼玛!作为个系统,你怎可以这样满脑子尽想这些东西!?
  • 追妻8000年:妖孽狐帝缠上我

    追妻8000年:妖孽狐帝缠上我

    “小音,我饿了。”“小音,去给我煮壶咖啡。”“小音,你,睡在这里!”……一滴鲜血,她无意中放出了被封印在古镜中自称灵神的“狐妖”,就此被他缠上。她的乳鸽汤,他喝了!她的烧鹅腿,他啃了!她的吊椅,成了他的专座!她的银行卡,他存了好多好多钱(女主瞪圆双眼,money!)!她的床,他与她共眠(女主花容失色,他……他……他在解裤扣)!“我……爱你!”在城市的高空,她揉着他毛茸茸的耳尖终于表白。[八千年的等待,月圆之约,是谁与谁的曾经?镜中双影缠绵,锁住的又是谁人记忆?]
  • 异种之名

    异种之名

    从感染蜕变的那一刻起,异种之名便以铭刻于心。
  • 末世危年

    末世危年

    是生存,还是死亡?在这个弥漫着恐怖气息的大陆上,只有物竞天择,弱肉强食的法则。要问法律?笑话,如今的法律就是谁的拳头大,谁就是法律。且看张宇以及他的团队是如何在这个世界上勇敢生存下去的......
  • 超级挂机系统

    超级挂机系统

    校花,神医,特种兵……统统到我碗里来!差生林易,偶得神奇系统,专收能人异士,校花美女,全天24小时为他赚钱。什么?这还不够?好吧,那就勉强将他们的技能拿来用用,让我成为一个真正的全能高手!