“实验目的”学会测定人或动物红细胞脆性的方法,能根据结果分析血浆晶体渗透压对红细胞渗透脆性的影响,加深理解血浆晶体渗透压对维持红细胞正常形态的生理意义。
“实验原理”
红细胞膜对低渗溶液有一定的抵抗力,其大小用渗透脆性来表示,所以将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中,可检查红细胞膜对低渗溶液的抵抗力大小。正常红细胞在0.46%~0.42%NaCl溶液中开始出现部分溶血,其低渗盐溶液浓度为该红细胞的最小抵抗力,即最大脆性;在0.34%~0.32%NaCl溶液中开始出现全部溶血,其低渗盐溶液浓度为最大抵抗力,即最小脆性。
“实验对象”人或家兔
“实验用品”试管架及小试管、滴管、2ml吸管、l%NaCl溶液、蒸馏水。
“实验准备和步骤”
1.配制溶液。取小试管10支,编号依次排列在试管架上。按要求,用2ml吸管分别向各试管中加入1%NaCl溶液和蒸馏水,配制10种浓度的低渗盐溶液。
2.
制备抗凝血。从肘正中静脉用灭菌干燥注射器取血lml(或直接作免心脏穿刺取血lml),放人加有抗凝剂的试管中,制备成抗凝血。然后分别向各试管加入1滴新鲜抗凝血,将血液与NaCl溶液充分混匀,切忌用力振摇,静置1小时后观察结果。
3.观察结果
(1)未发生溶血的试管:液体上层为无色或极淡的红色,下层为混浊红色,表明无红细胞破裂。
(2)
部分溶血的试管:液体上层出现透明红色,下层为混浊红色,表明部分红细胞已破裂,称为不完全溶血。开始出现不完全溶血的低渗盐溶液浓度,是该血液红细胞的最小抵抗力(即最大脆性)。
(3)全部溶血的试管:液体变成完全透明红色,表明红细胞全部破裂,称为完全溶血。开始出现完全溶血的低渗盐溶液浓度,为该血液红细胞的最大抵抗力(即最小脆性)。
“注意事项”
1.滴管、试管必须清洁干燥。
2.选用口径与大小一致的小试管,准确地配制不同浓度的低渗盐溶液,避免浓度误差。每支试管加一滴血,加血量要准确。
3.减少机械震动,避免人为的溶血。用手指堵住试管口,轻轻倾倒1~2次混匀。
“思考题”
1.影响红细胞渗透脆性的因素有哪些?
2.红细胞渗透脆性的大小有何临床意义?