“实验目的”本实验目的是通过复制失血性休克动物模型,观察休克发生、发展过程中微循环、心、肺功能各指标的改变;并观察血管活性药物对这些指标的影响。
“实验原理”失血是休克的常见原因。机体失血时血容量减少,严重时可引起血压下降甚至休克。一般而言,血容量锐减(如肝、脾破裂等)超过总血量的20%以上时,即可发生休克。其机制为,血容量锐减,血压下降,继而经压力感受器反射引起交感神经紧张性加强,外周血管收缩,组织血液灌注量减少,导致急性微循环障碍。休克的发生、发展一般要经历微循环缺血期、微循环淤血期和微循环衰竭期三个时期。依失血速度及程度不同,上述各期持续时间、病理生理改变及严重程度、临床表现均有所不同,临床上将失血性休克分为轻、中、重3种类型,其典型特征。
家兔正常收缩压为105mmHg(14kPa)左右,本实验使家兔失血使收缩压降至40mmHg时,相当于中、重度休克状态。
休克对机体的影响是多方面的。本实验着重观察失血性休克发生时微循环的改变,同时观察心肺等指标的变化。其中,①微循环的观察主要是着重观察毛细血管开放的数目、毛细血管出、入口的口径,血流速度、流态和方向。在中、重度休克时,微循环表现出毛细血管开放数目减少、血流缓慢和红细胞聚集。发生的机制是:与交感-肾上腺髓质系统兴奋,血液重新分布,血液浓缩,粘滞度增加等因素有关。②心肺等指标的观察即血压(收缩压和舒张压)、心率、减压反射和呼吸。中度失血性休克时,血容量锐减,血压下降,交感神经张力反射性增高,继而出现心率和呼吸加快;而重度休克时血压进一步下降,心、肺功能抑制,可出现心率减慢、呼吸困难和压力反射消失等。
根据休克的不同阶段其病理生理特征不同,治疗侧重点亦不同,止血和补充足够的血容量是治疗休克的关键,及时选择适当的血管活性药物也很重要。酚妥拉明为肾上腺素a受体阻断药,可舒张血管,反射性增加心肌收缩力和心率,对改善微循环障碍和休克症状具有积极作用。异丙肾上腺素激动β1受体,使心肌收缩力增强,心排血量增加,同时激动β2受体,降低动脉阻力,也具有良好的抗休克作用。
“实验对象”家兔(体重为2kg以上)
“实验用品”
BL-420E+生物机能实验系统一套、体视显微镜、微循环灌流装置一套、压力换能器,兔手术台、哺乳类动物手术器械一套、细塑料管动、静脉插管、输液装置一套、铁支架、压力换能器夹持器、纱布、手术线、注射器、小烧杯,20%氨基甲酸乙酯溶液(1.5%戊巴比妥钠)、0.5%肝素,0.9%氯化钠注射液,2.5%酚妥拉明和0.01%硫酸异丙肾上腺素。
“实验准备和步骤”
1.手术操作
(1)
麻醉与固定:取家兔1只称重,经耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯溶液4~5ml/kg(或1.5%戊巴比妥钠溶液2ml/kg)进行麻醉,麻醉后将兔仰卧位固定于兔台上。
(2)颈部手术:剪去颈部被毛,做颈正中切口。①分离气管并作气管插管。②分离右侧颈总动脉2~3cm(穿1线),分离左侧颈总动脉3~4cm(穿2线)并作左颈总动脉插管。③分离右侧颈外静脉(穿2线)并作右颈外静脉插管。本实验使用左颈总动脉作动脉插管连接压力换能器,右颈总动脉作检查减压反射用,右颈外静脉插管可连接输液装置作给药用。
(3)腹部手术:剪去一侧腹股沟部被毛,在动脉搏动明显处做一切口。①分离一侧股动脉(穿2线)并作插管以备放血用。②在腹部左侧距中线5cm处剪毛,做长度约为6cm的纵行切口,打开腹腔以备观察小肠襻微循环。
将肠系膜放置在微循环灌流盒的凸形平台上,用固定板压住小肠,盒内注入的生理盐水与平台相齐为宜。注意调整光源使之汇聚在平台上,以利显微镜观察。
2.
实验系统连接。压力换能器用配套的换能器夹持器固定在铁支架上,将压力换能器连接到生物机能实验系统的1通道,观察记录动脉血压和心率。将系有线的手术针,钩在呼吸活动度较大处的胸壁上,线的另一端系于张力换能器的小孔处,将张力换能器小孔向上固定在铁支架上,张力换能器连接到生物机能实验系统的2通道,记录呼吸运动。
3.
实验系统进入和参数设置。双击桌面机能实验图标启动系统软件进入NewCentury系统软件主界面→选择“实验项目”→“循环系统实验”→“动脉血压的调节”实验模块。
开始实验前,从静脉插管处向兔体内注入0.5%肝素2~3ml,防止血液凝固而影响压力传导。
4.观察项目
(1)放血前:实验时首先观察并记录放血前各项指标的数值。
(2)第一次放血:将0.5%肝素1ml放人小烧杯内,打开股动脉插管出口,把血放入小烧杯内,待兔收缩压降至40mmHg(5.33kPa)时,停止放血,若血压回升可再放血,使血压维持在40mmHg约20min,其间观察动物微循环、血压、心率、呼吸变化情况,检查减压反射。
(3)回输血抢救:从颈外静脉快速输入放出的血,而后视血压回升情况,可再输入适量的0.9%氯化钠注射液,观察上述各项指标是否恢复正常。
(4)第二次放血:重复第(2)项实验,使收缩压降至40mmHg并维持约20min,观察记录上述各项指标。
(5)药物抢救:从颈外静脉给予0.01%硫酸异丙肾上腺素0.1ml/kg和2.5%酚妥拉明0.2ml/kg,观察上述各项指标的变化。
“结果记录与报告要求”
1.实验目的
2.实验结果与结果分析。按要求记录结果,用实验报告纸书写报告。
3.实验结论
“注意事项”
1.所用的血管插管均应肝素化,以防止凝血。
2.本实验减压反射的有无可通过拉紧右颈总动脉引线或阻断右颈总动脉血流,观察血压有无变化(△P)来确定。
3.微循环的观察特别要注意动态观察,对比观察。实验时最好边放血边同时动态观察微循环的改变情况。
4.由于在一个显微镜视野下,一般很难同时观察到所有现象,需实验小组间交叉观察或改换肠系膜观察。
5.由于毛细血管交替开放,在生理条件下微循环某些部位的血流可处于停滞状态。
“思考题”
1.失血性休克的主要病理变化有哪些?其机制是什么?
2.失血性休克的抢救的关键是什么?
3.哪些药物可用于抢救失血性休克?其作用及应用原则是什么?