伏特出生于一个富有的天主教家庭里，从小就读过许多书，逐渐培养起了对科学的兴趣。在青年时期，他就摸索着做电学实验，他有个好友叫加托尼，不但送给他一些仪器，还在自己家里腾出一间房子，做他的研究室。
在做实验的过程中，伏特总是会遇到这样那样的问题，那个时候通讯手段不像现在这么发达，他便写信向一些着名的电学家求教。都灵的贝卡里亚是一位国际知名的电学家，他在写给伏特的信中，诚恳地劝告他少提出理论，多做实验。贝卡里亚的教导对伏特影响很大，他便利用自己掌握的电学知识，动手制作一些仪器。
伏特制作的最有名的仪器是他于1775年发明的起电盘。它由一块绝缘物质制成的平板和另一块带有绝缘柄的导电平板构成，通过摩擦的方法使绝缘平板带上正电（或带负电），再将接地的导电平板覆盖在带正电的绝缘板上，因静电感应，导电平板靠近绝缘平板的一侧带负电，另一侧的正电因接地而消失；断开导电平板的接地线，手握绝缘柄将导电平板与绝缘平板分开，导电平板上便带上了负电。这个发明非常精巧，以后发展成为一系列静电起电机。
就在起电盘发明后的第二年，伏特就被聘为科莫皇家学校的物理教授。1779年，他又被任命为帕维亚大学物理学教授，他的名声渐渐地扩展到意大利以外，被苏黎世物理学会接纳为会员。
1792年，伏特看到了一篇论文，是由一位名叫加伐尼的意大利解剖学家写的。他说动物的肌肉里贮存着电，用铜丝或金属丝接触动物的肌肉，就可以把电引出来。看了这篇论文，伏特觉得非常新奇，便决定亲自来做这个实验。他找来许多只活青蛙，反复进行实验，最终发现实际情况并不像加伐尼所说的那样，蛙腿之所以会收缩，那是两种不同的金属接触产生的电流造成的。为了证明自己的发现是正确的，伏特继续进行实验。这一天，他找来一块锡片和一枚银币，把这两种金属放在自己的舌头上，然后吩咐助手用金属导线把它们连接起来。刹那间，他感到满嘴都是酸味儿。接着，他将银币和锡片交换了位置，当助手将金属导线接通的一瞬间，伏特感到满嘴都是咸味儿。
伏特仔细地分析了这些现象，发现导电体可以分为两大类：第一类导体是金属，它们接触时会产生电势差；第二类导体是液体，它们与浸在里面的金属之间没有很大的电差。当两种金属接触时，就会出现一个带正电一个带负电的现象；当几种金属接触时，电的作用（电压）只取决于两端金属的性质，和中间的金属没有关系（后人把这个性质总结为伏特定律）。
既然两种金属相互接触能产生电流，如果能想办法把它引出来，肯定会大有作用。在这种思想的指导下，伏特经过长达八年的实验，终于发明了一种装置：在铜板和锌板中间夹上卡纸和用盐水浸过的布片，一层一层堆起来。伏特把这种装置称为“电堆”（干电池的前身），它能产生连续的电流，要比从静电起电机得到的电流大。在相当一段时间里，它成了产生电流的唯一手段。直到今天，这种电池仍然在使用。
电池的发明立即引起了所有物理学家的欢呼。1801年，伏特应拿破仑的邀请前往巴黎，在法国科学院表演了他的电堆实验，当时拿破仑也在场，他立即下令授予伏特一枚特制金质奖章和一份养老金，就这样拿破仑成了伏特的保护人。1804年，伏特要求辞去帕维亚大学教授的职位退休回家时，被拿破仑拒绝了，他赏赐给伏特更多的名誉和金钱，并授予他伯爵称号。拿破仑倒台后，伏特并未遇到什么麻烦。他对政治毫不关心，只专心于自己的研究，因此能安然地度过那个激烈动荡的历史时期。
伏特人生最后的八年是在他的坎纳戈别墅和科莫附近度过的。1827年，伏特去世，终年82岁。为了纪念他，人们把电动势、电位差、电压的单位取名伏特，简称“伏”。
