二、屏障环境及设施的管理
（一）设施启用前的净化操作
一个新建（改建）和停用后新引入动物的饲养室或实验室在使用前必须进行净化处理。
1.启动运行净化处理的顺序开机→清扫清洁区→净水洗刷→洗涤剂洗刷→净水洗刷→关机→封闭通道口→喷雾消毒→启封各通道→换气24h，消毒剂擦拭→封闭通道→熏蒸消毒→启封各通道→换气3天→检测落下菌数→结果（合格→启用，不合格→重复净化消毒）。
2.启用运行前仪器设备进入将实验所需常规仪器、设备、笼架具、超净台等移入洁净区，对怕腐蚀的仪器设备要进行保护。
3.启动前净化操作的具体步骤和要求
（1）启动送、排风机，调整好风量、气流速度、换气次数及压强梯度，设备稳定运行24h。
（2）清扫清洁区顺序：天花板→墙壁→笼架具→仪器设备→实验台→地面。
（3）清扫后用净水将地面、墙面、实验台洗刷3遍，洗刷后再用中性洗涤剂洗刷，最后用净水刷洗干净，关闭送、排风机，封闭与外界相通的所有通道。
（4）操作人员穿戴好防护服，将配制好的消毒液装入喷雾器，进行喷雾。常用的喷雾剂为过氧乙酸，其使用浓度为2%过氧乙酸，用量10ml/m3，喷雾后保持2～3h。
（5）操作人员穿戴好防护服，进入洁净区，解封各通道，送风换气24h。
（6）甲醛熏蒸：熏蒸程序与喷雾程序相同，熏蒸时操作人员必须穿戴好防护服和防毒面具，一般使用剂量为10%浓度的甲醛40ml/m3中加入30g/m3高锰酸钾，产生气体后操作人员迅速退出并封闭门，保持24h以上作用时间。若采用加热法熏蒸，使用浓度为10%的甲醛25～50ml/m3作用24h以上。
（7）操作人员穿戴好无菌保护服，戴好无菌防毒面具进入洁净室，启封各通道口，开始送风换气2～3天，最后测定室内落下菌。
（二）进出屏障环境设施的操作管理
1.人员工作人员进入第一更衣室脱掉全部衣服，进入淋浴间淋浴10～30min，淋浴后将用过的毛巾拖鞋放在淋浴间，进入第二更衣室站在预先放好的灭菌毛巾上，用灭菌毛巾擦干身体，穿上已灭菌好的工作服，戴上工作帽（头发不许外露）、手套。在离开第二更衣室之前打开淋浴间内门，把用过的毛巾和包布放在淋浴间（这些物品由下一个进入淋浴间的人放入第一更衣室），这时工作人员可以进入工作间。如果灭菌衣物需要补充，工作人员必须先去洁净间取灭菌过的衣物放在内更衣室，以便下次使用。
2.动物动物必须通过传递窗传入。传递动物时一个人在清洁间，另一个在洗刷间。在洗刷间的人确认传递窗对侧门关闭时，打开进口，把运输盒放进传递窗，然后用喷雾器喷过氧乙酸，关闭进口，15min后由在清洁间的人打开内口，在传递窗内启开运输盒把动物移到预先准备好的灭菌饲育盒里，运输盒留在窗内，取出饲育盒关闭内口，把动物送入饲育室。动物传出：工作人员在动物房把动物装入运输盒（要带过滤膜），用胶带封好后经污染走廊放在缓冲间，负责发送动物的人从缓冲间取走。
3.物品和用具
（1）灭菌柜的使用清洁区使用的全部鼠盒、水瓶、水、饲料、垫料、衣服等耐热物品都必须经过双门真空高压灭菌柜灭菌后方可进入清洁区，灭菌柜的操作要严格按操作规程进行。每次灭菌都必须进行安全测试，确保达到有效灭菌（用试纸法或培养法）。开启灭菌柜进口时必须在灭菌柜出口关闭状态下进行，相反在确认灭菌柜进口关闭状态下开启出口。操作人员必须在放入或取出柜内物品后随手关闭柜门。
（2）传递窗和渡槽的使用不耐热类物品经过渡槽或传递窗进入清洁区。传递窗的使用方法同传递动物一样，只是物品摆放时要留表面空间，使其充分消毒，存放时间要超过30min。也可用高强度紫外灯照射灭菌。耐酸、耐水的物品可经渡槽进入清洁区。渡槽内存放消毒药水的液面无论任何时候都不能低于隔离板，要经常检查药液并补充。槽内消毒液一般3～4个月更换一次，更换时先把清洁区一侧的盖封严，然后打开排水阀，水排完后把新配好的消毒水由外侧加入渡槽。使用时工作人员把物品由外间放入渡槽，然后由清洁区的工作人员戴橡胶手套取出。传渡的物品在槽内存放时间不少于30min。
（三）屏障环境及设施操作管理规程
1.工作人员屏障环境及设施（繁育）操作规程
（1）工作人员在休息室脱下饰物、换鞋、洗手。
（2）进入第一更衣室脱衣、换鞋。
（3）进入淋浴室，洗漱口腔，全身淋浴10～30min，然后在清洁区用消毒毛巾擦干身体。
（4）进入第二更衣室，穿无菌工作服，戴口罩及工作帽，穿工作鞋，戴工作手套。
（5）经缓冲间、风淋室，通过清洁走廊后去清洁准备区，把当天使用的东西装在运输车一次推到饲育间或实验室。
（6）然后到第一间饲养室工作，检查室内环境及动物一般情况，清除污物、粪便，打扫卫生，把污物及污染器具从后门放在污染走廊上。加灭菌饲料、饮水，更换消毒垫料。做好繁殖、育种、室内环境及动物情况的记录，特别对异常情况及处理办法要认真记录。
（7）第一间工作完成后，从前门通过清洁走廊进入第二间，按第一间要求进行工作。这样依次完成，最后从工作间后门出去进入污染走廊。
（8）将污染走廊上的污物及污染器具全部送清洗消毒间进行清洗消毒备用。
2.工作人员在洁净区内工作时注意事项
（1）途经所有的门都必须随开随关，不能有敞门现象。饲育间与污染走廊的门必须上锁。
（2）SPF室每周更换垫料1～2次，室内消毒1次，用药水擦四壁、笼架、拖地，定期喷雾消毒。笼具每周消毒1～2次。
（3）保持准备室和浴室、走廊清洁无尘，每天用药水擦拭、拖地，定期用过氧乙酸喷雾消毒。紫外线灯管使用1000h要及时更换。
（4）隔月做一次落下菌检查。每季度对动物做1次微生物检查，发现问题应及时采取措施。
（5）工作人员要做好下次进室的各项准备工作。
（6）工作人员患有感冒、腹泻及胃肠不适、真菌性皮肤病或有伤口及发热等疾病时，不得进入清洁区工作。
三、独立送风笼具的使用管理
（一）IVC操作使用前的准备工作
1.启动超净工作台风机，净化台内环境，打开工作灯达到工作照度。
2.检查超净工作台中已准备的各种灭菌饲养和实验物品（饲料、垫料、酸化水及实验用物）是否齐全。若需更换笼盒，应先检查灭菌笼盒准备情况，并用不锈钢推车将其移至超净工作台旁边。
3.检查喷雾器喷洒效果及超净台内外擦抹用的药液是否配置好。
4.打开房间内排风系统，排除打开笼盒时逸出的有味气体。
5.检查IVC机组各种仪表指针及扫描目视各笼盒内的动物情况，估测IVC运行情况。
6.记录影响实验动物生长、发育的主要环境参数，如温度、相对湿度、日温差、笼盒内外压差等。
（二）IVC操作使用程序及操作规范
1.人员戴好一次性口罩、帽子及医用乳胶手套（注意：戴手套前应洗净手及指甲，若指甲太长应适当修剪，以免戳破医用乳胶手套）。
2.用双手轻轻抬起IVC笼盒外端，沿笼架搁挡向外移出笼盒。
3.用药液喷雾器充分喷洒双手手套外表及IVC笼盒的外面。也可将戴手套的双手浸入药液中消毒。另外，用消毒药液浸泡的毛巾，擦拭IVC笼盒外表。
4.打开超净工作台拉门（高度只要能使笼盒进入即可），把笼盒移入超净工作台。
5.打开IVC笼盒盖底之间的紧固扣，取下笼盖，并侧放在一边。
6.目视笼盒中动物的生活情况，做出添料、加水、换盒及动物实验的选择，并实施。
（1）加饮饲料啮齿类动物为自由采食（因实验需要，限量供给除外），添加时，加满料斗即可，根据动物的数量，一般加一次料可维持3天左右。
（2）饮用水啮齿类动物的饮水量不大，一瓶250ml的水对4～8只小鼠，维持3天绰绰有余。断水的主要原因是水瓶或饮水口漏水。防止断水的关键是选择优质水瓶和灌水后瓶盖的拧紧。打开笼盒，取出水瓶。观察水瓶中剩余水的水质是否浑浊，如发现浑浊，立即更换水瓶，换上一瓶清洗过水瓶并经灭菌的饮用水。若剩余水清澈，未发现有污染的情况，则可使用原来水瓶，在超净台中直接通过龙头灌装超滤酸化水，继续使用。装毕，关龙头阀门，防止泄漏，腐蚀超净工作台台面。
（3）更换笼盒由于笼盒内换气次数高，带走了盒内水分，保持盒内垫料干燥及空气清爽。笼盒一般可延长到2～3周更换一次。IVC笼盒的更换，可先将灭菌过的笼盒移入超净工作台中，铺放适量灭菌垫料，然后打开需换笼盒的金属网盖，加足饲料及饮用水，盖上盒盖，扣上紧固扣盖IVC笼盖，扣紧笼盒搭扣，送回IVC笼架，最后把原笼盒上的动物卡片移插至新的笼盒上，并把换下笼盒放入专用塑料袋中，扎紧集中外运处理。当然，更换笼盒也可只换笼盒底盒，不换盒盖，这要视笼盒的使用情况而定。更换笼盒时，有时也可顺便检查一下盒盖上的终端过滤器情况，并做适当处理（互相对换、换膜等）。
7.动物实验按上述方法，打开笼盒盖，在超净工作台内再次对戴有乳将胶手套的双手用75%的乙醇棉球擦拭消毒灭菌，从笼盒中取出动物，放在小动物手术台上，麻醉、捆绑四肢、手术、止血、缝合，或灌药、注射、采血，或处死、解剖、取标本等。实验完毕，顺便检查一下动物饲料、饮水及笼盒的污染情况，该添就添，该加则加，该换就换。一切视情况而定。
做完超净工作台中饲养和实验工作，盖好笼盒，打开超净台移门，取出笼盒，放在IVC笼架上原位（如需更换位置，则另作别论），对准笼架进出风口沿笼架搁挡，轻轻推入，接口后在笼架固定钮内放下即可。
操作第二个笼盒或做下一组合的动物实验。
（三）操作注意事项
1.操作之前，工作人员使用75%的乙醇进行双手消毒。
2.使用0.5%过氧乙酸对超净台工作面进行消毒，半小时后启动超净台电机；通风0.5～1.0h 后，即可使用。
3.系统上的动物饲育盒必须在超净台内方可打开，更换水瓶、加饲料、观察动物、动物给药等都必须在超净台内进行；操作过程应该是无菌操作，防止微生物污染。
4.超净台使用完毕，使用消毒药进行消毒，停机。
5.每次工作完毕，对设施进行清洁卫生，同时对设施内空气进行喷雾消毒。
6.本系统所用的饲料、垫料、饮用水、饲育盒都必须经过灭菌处理；为了延长饲育盒使用期，可用0.5%过氧乙酸喷雾灭菌。
7.遇设备故障或停电等突发事件，必须尽快打开动物饲育盒“生命口”上的盖子，以防动物窒息死亡；设备恢复正常后，重新盖好盖子。
8.通过送风机箱上的送风量调节钮来调整送风量，一般情况下，维持空气压力在20～50Pa 之间。请经常清洗初效过滤器或更换高效过滤器。
四、隔离系统设施的管理
（一）隔离器的使用
1.使用前的准备隔离器是一个完全密封环境，因此使用前先测有无漏气，再向室内充气，内压达55mmH2O，经48h，膜室手臂仍保持挺直状态，说明不漏气，然后进行灭菌，向隔离器内喷2%过氧乙酸，约250ml，作用12h（进排风口用薄膜封口）。消毒后通风3～4天（用镊子捅破进出风口），直至排出气体不带酸味方可使用。在使用中定期测风速和换气次数，定期更换高效过滤器（半年），各项指标达到标准后方可使用。注意随时检漏补漏，使用期一年。
2.灭菌渡舱的使用灭菌渡舱是隔离器传递动物、物品的通道，传入物品时先打开渡舱外盖帽，将物品放入，然后封严外盖帽，通过上面喷口喷入2%过氧乙酸约10ml对物品表面进行灭菌，作用40min后，打开内盖帽，将物品取出同时传出物品，将传出物品放入，封严内盖帽，再打开外盖帽取出物品。
3.灭菌罐的使用将消毒包装好的饲料、垫料、水瓶及用具放在桶内隔板上，用耐高压薄膜封口，胶带固定进行高压灭菌（121℃、30min）。传入前，先将连接袖一端套上灭菌罐封口，用胶带密封固定，再将连接袖另一端与灭菌渡舱外口连接，用胶带密封，从连接袖通风口处喷入2%过氧乙酸约10ml，至连接袖膨隆为止，静置40min，脱下内盖帽，将灭菌罐内隔板拉出，取出物品，同时将待传出物品故在隔板上，连隔板一起退回灭菌罐内，盖上内帽，在灭菌柜外取下连接袖和传出物品，擦净灭菌柜，盖上外帽，在灭菌柜的通风口处喷上2%过氧乙酸，至内外帽充分隆起为止。灭菌罐滤材每年都要更换。待发动物的包装及传递：近距离运输可用灭菌纸袋或隔离帽鼠盒装运，长途运输需用灭菌罐，传递程序同前。
（二）无菌隔离器室的管理
1.非本室工作人员不得入内。
2.进入本室前必须更换工作服、帽、鞋，用肥皂洗手，并用0.1%新洁尔灭溶液浸泡消毒。
3.保持室内整洁，及时处理操作时新留下的废物。
4.每周定时用消毒液擦拭隔离器薄膜表面、架子、室内门窗。
5.每天下班前清扫地面，并用0.2%过氧乙酸溶液喷雾消毒室内空间，用0.2%新洁尔灭溶液擦拭隔离器表面。
6.集中送风的中效过滤器每3个月更换一次，初效过滤器每2周清理一次，隔离器每6个月清洗消毒一次，经灭菌检查合格后再将动物移入饲养。
（三）隔离器的日常工作
1.每个隔离器内的饲养盒位置应相对固定，不要随便更换位置。
2.干净的物品应放在进风口侧，用过的物品应放在出风口处。
3.每周原则换垫料2次，每次操作完毕必须清理隔离器内部，保持整洁。
4.每日应定时检查饮水、饲料，并及时补充。
5.做好谱系记录，以鼠盒为单位做好繁殖、供应及转送记录。
6.及时填写隔离器内应传入物品及传入日期，以便提前做好灭菌等项准备。
7.定期取样送检做微生物检查。隔离器灭菌检查，定期对隔离器四壁、手套、出进风口做涂抹标本，进行细菌检查。每月取动物新鲜粪便做细菌和寄生虫检查。传入的饲料、垫料、饮水取样放在试管中做细菌检查。每只淘汰、死亡尸体做全面尸检。
8.定期检查薄膜室空气压力和定期更换过滤器的过滤材料。
9.一旦发生停电，立即将全部过滤器的外口用橡皮塞塞紧。停电时间长者，计算每隔4h输氧一次，记录每次输氧时间和容量。恢复供电时，打开过滤器外口的橡皮塞，使隔离器正常工作。同时，要做好事故、采取措施及隔离器内异常情况的记录。当发现隔离器漏气时，必须立即找出漏气的原因，并记录漏气的部位、漏气孔的大小、发现的时间、采取的紧急措施、执行人及事故发生后微生物检查的结果等。
五、层流架的使用管理
（一）层流架的消毒
1.层流架启用前，对要放层流架的实验室进行一次全面的清洗消毒。可用过氧乙酸喷雾或用甲醛熏蒸，作用48h。
2.启动鼓风机，让其连续运转48h，将静压箱及工作区的污染空气全部排除，再用药液擦拭层流柜各部件的表面。
3.可将层流柜与房间一起熏蒸消毒或制作塑料薄膜罩，罩住后用2%的过氧乙酸喷雾并保持2h。
4.落下菌及粒子数检查：取血琼脂培养皿，置于架内工作区每角一个，开盖暴露10min 后取出培养48h，要求平均落下菌数≤3个，无致病菌，洁净度达到1000级，合格后方可使用。
（二）层流架管理规程
1.安放层流架房间的管理非本室工作人员不得入内，进入本室前必须更换衣、帽、鞋，用肥皂洗手，并用0.1%新洁尔灭溶液浸泡消毒，保持室内整洁，每周定时对室内地面、层流架面药液消毒，每日下班前用0.2%过氧乙酸喷雾室内空间。
2.层流架日常操作进入工作区的饲料、垫料、笼具、饮水及其他用具，都要事先包装好经严格的消毒灭菌。工作人员换鞋、衣，穿无菌工作服，戴口罩，戴上长手套后在消毒液中浸泡数分钟；打开紫外线灯10～15min；打开操作层门，双手迅速放入操作层，然后换消毒垫料，加灭菌饲料和水，套上过滤帽放回原位；再消毒手套、镊子后操作第二层笼盒，依次至工作完毕；操作完毕后打开紫外线灯消毒10～15min，并用消毒液擦拭操作层，做好生产或实验记录；保持好室内温、湿度，氨浓度不超标，定期对层流架的工作性能及状态进行检测，并做必要的处理。
六、洁净物品的消毒管理
（一）饲料的灭菌
1.高压灭菌将饲料盛于深2.5～5.0cm的金属网具里，使气流能迅速贯穿饲料，121℃灭菌20～30min。如果采用预真空高压灭菌，时间可缩短到4min左右。温度高、时间长易发生饲料焦化与营养成分的破坏，可用灭菌指示剂指示高压灭菌效果。灭菌指示剂封装于安瓿中，放在每个包裹的中央。
2.射线辐照饲料灭菌最好选择60Co射线辐照法，SPF动物饲料的照射强度为25kGy。而无菌动物、悉生动物通常用50kGy的剂量。有一种黄色或菊黄色的剂量指示剂标签贴在包装箱的正、背面上，当黄色的标签变成了暗红色时表示包装袋里的饲料已吸收到25kGy的剂量。无菌动物与悉生动物的饲料往往在第一次辐照以后再贴上第二张标签做第二次辐照。包装饲料时每袋装12.5kg饲料，用塑料袋包装，最好真空封口，包装用双层塑料袋，每一个袋密封后再套第二个袋，最后置于纸袋、塑料袋或纸箱中，并贴上指示剂标签。
（二）垫料的灭菌
常用高压灭菌法与饲料灭菌相同。灭菌后的垫料的水分含量较高，应连同包装袋放在烘箱内干燥后使用。
（三）笼器具的灭菌
笼器具的消毒可用高压灭菌法，不能高压灭菌的笼器具可用药液浸泡，常用液有：2%～3%石炭酸液、0.1%～0.5%新洁尔灭、3%～5%来苏水、0.1%～1%漂白粉液和0.05%～2%过氧乙酸液等。
（四）饮水的灭菌
除可用高压灭菌外，也可用无菌水生产设备制作，或在水中加入盐酸，使水的pH值达2.5～2.8也可应用。可将动物饮用水和冲洗用水分别要求。
（五）无菌工作服的管理
无菌工作服要选用耐高温高压、抗腐蚀、不产生绒毛的材料。常用的样式如下。
1.上下连体式从头到脚都应起隔离作用，不露皮肤，适用于万级洁净度的动物室。
2.上下分离式主要用于SPF级以下洁净度的洁净动物室。
3.大褂式一般用于洁净区外的工作场所。
工作服消毒常用高压灭菌法。
第四节 实验动物环境及设施的监测及维护
一、实验动物环境及设施指标的检测
新建或改建的实验动物和动物实验设施在启用前必须进行环境指标检测，即使是使用过程中也有必要对有关环境指标进行检测，检测方法介绍如下。
（一）环境温湿度的测定
1.测定条件
（1）实验动物设施环境温度测定应在实验动物设施竣工且空调系统运转48h后或设施正常运行之中进行测定。测定时，应根据设施设计要求的空调和洁净等级确定动物饲育区及实验工作区，并在区内布置测点。
（2）一般饲育室应选择动物笼具放置区域范围为动物饲育区。
（3）恒温恒湿房间离围护结构0.5m，离地高度0.1～2.0m处为饲育区。洁净房间垂直平行流和乱流的饲育区与恒温恒湿房间相同。
2.测量仪器测量仪器精密度为0.1以上标准水银干湿温度计及热敏电阻式数字型温湿度测定仪。
3.测定方法当设施环境温度波动范围＞±2℃，室内相对湿度波动范围＞10%时，温湿度测定宜连续进行8h，每次测定间隔为15～30min。
（二）环境气流速度的测定
1.测定条件
（1）在实验设施运转接近设计负荷，连续运行48h以上进行测定。
（2）一般空调房间应选择放置实验动物用具的具有代表性的位置及室内中心位置布点。
（3）恒温恒湿设施应选择在离围护结构0.5m，离地高度1.0m及室内中心位置布点。
2.测量仪器测量仪器为精密度为0.01以上的热球式电风速计，或智能化数字显示式风速计，校准仪器后进行检测。
3.测定方法
（1）检测在洁净试验区或动物饲育区内进行，当无特殊要求时，于地面高度1.0m处进行测定。
（2）乱流洁净室按洁净面积≤50m2，至少布置测定5个测点，每增加20～50m2，增加3～5个位点。
（三）环境换气次数的测定
1.测定条件在实验动物设施运转接近负荷连续运行48h以上测定。
2.测量仪器测量仪器精密度为0.01以上的热球式电风速计或智能化数字显示式风速计。
3.测定方法通过测定送风口风量（正压式）或出风口风量（负压式）及室内容积来计算换气次数。
4.计算公式
公式1：
Q=3600Sv
式中：Q-—所求换气量，（m3/h）。
S-—风口有效面积，（m2）。
v-—平均风速，（m/s）。
公式2：
n=Q/V
式中：n-—为换气次数（次/h）。
Q-—所求换气量（m3/h）。
V-—为室内容积（m3）。
（四）环境梯度压差测定方法
1.检测条件
（1）静态检测在洁净实验动物设施空调送风系统连续运行48h以上，已处于正常运行状态，工艺设备已安装，设施内无动物及工作人员的情况下进行检测。
（2）动态检测在洁净实验动物设施已处于正常使用状态下进行测试。
2.测量仪器测量仪器为精度可达1.0Pa的微压计。
3.测定方法
（1）检测在实验动物设施内进行，根据设施设计与布局，按人流、物流、气流走向依次布点测定。
（2）每个测点的数据应在设施与仪器稳定运行的条件下读取。
（五）环境空气洁净度检测方法
1.检测条件
（1）静态检测在实验动物设施内环境净化空调系统正常连续运转48h以上，工艺设备已安装，对洁净区及其净化空调系统进行彻底清洁，室内无动物及工作人员的情况下进行检测。
（2）动态检测在实验动物设施处于正常生产或实验工作状态下进行检测。
2.检测仪器尘埃粒子计数器。
3.测定方法
（1）静态检测测量仪器充分预热，采样管必须干净，连接处严禁渗漏；采样管长度，应为仪器的允许长度，当无规定时，不宜＞1.5m；采样管口的流速，宜于洁净室断面平均风速相接近。检测人员应在采样口的下风侧。
（2）动态检测在洁净实验动物设施内，实验动物饲育室与动物实验室区域内，选择有代表性测点的气流上风向进行检测，检测方法操作细则与静态检测相同。
（3）测点布置检测洁净实验工作区时，如无特殊实验要求，取样高度为距地面1.0m 高的工作平面上；检测洁净实验动物室时，取样高度为笼架高度的中央水平高度为0.9～1.0m 的平面上；测点间距为0.5～2.0m，层流洁净室测点总数不少于20个。乱流洁净室面积不大于50m2的布置5个测点，每增加20～50m2，应增加3～5个测点。每个测点连续测定3次。
4.采样流量及采样量
（1）100级要求洁净实验动物设施采样流量为1.0L/min，采样量不小于1.0L。
（2）1000级以上要求的洁净实验动物设施采样流量≤0.5L/min，采样量不少于1.0L。
5.结果计算
（1）每个测点应在测试仪器稳定运行条件下连续采样测定3次，计算求取平均值，为该点的实测结果。
（2）对于大于或等于0.5μm的尘埃粒子数确定：层流洁净室取各测定点的最大值；乱流洁净室取各测点的平均值作为实测结果。
（六）环境空气落下菌数检测方法
1.测定条件实验动物设施环境空气中落下菌数的测定应在实验动物设施空调净化系统正常运行48h，经消毒灭菌后用90mm血液琼脂培养基进行检测。
2.测点选择每5～10m2设置1个测定点，将培养皿放于地面上。
3.测定时间平皿打开后放置30min，加盖，放于37℃恒温箱内培养48h后计算菌落数（个/皿）。
（七）环境噪声检测方法
1.检测条件
（1）静态检测在实验动物设施内环境通风、净化、空调系统正常连续运转48h后，工艺设备已安装，室内无动物及生产实验工作人员的条件下进行检测。
（2）动态检测在实验动物设施处于正常生产或实验工作状态条件下进行检测。
2.检测仪器声级计。
3.测定方法
（1）测点布置面积＜10m2的房间，于房间中心离地1.2m高度设一个点，面积＞10m2的房间，在室内离开墙壁反射面1.0m及中心位置，距地面1.2m高度布点检测。
（2）实验动物设施内噪声测定以声级计A档为准进行测定。
（八）环境内照度测定方法
1.测定条件实验动物及动物实验设施内工作照度，在工作光源全部接通，并正常使用状态下进行测定。
2.测定仪器便携式照度计。
3.测定方法
（1）在实验动物设施内选定几个具有代表性的点进行测定。
（2）距地面0.9m，离开墙面1.0m处测定。
（3）打开动物笼盖或在笼网上测定光照强度。
（4）使用电光源照明时，应注意电压时高时低的变化，应使电压稳定后再测。
二、实验动物环境及设施的维护
实验动物设施的各项环境指标是靠其相关的各种设备来维持的，并处于动态的变化中，通过对实验动物设施环境指标的监测，可随时掌握设备的运行情况，并采取相应的调整和维护。
（一）空气净化设备的维护
实验动物屏障设施中，空气过滤器是空气净化系统中最主要的设备。空气净化设备主要包括初效、中效和高效过滤器。
初效过滤器主要阻挡粒径在5.0μm 以上的异物或尘粒。这种过滤器大多采用金属丝网浸油过滤器、自动清洗油过滤器、粗孔聚氨酯泡沫或玻璃丝过滤器，以及多种人造纤维滤材。使用时一般风速控制在2m/s以内。实验动物屏障设施常用的初效过滤器一般采用人造纤维滤材，安装在新风口之后表冷器之前，以防止表冷器上积尘过多而降低传热效率；中效过滤器主要阻挡粒径在1.0μm 以上的悬浮性尘粒。滤芯材料大多采用玻璃纤维、中细孔聚乙烯泡沫塑料和由涤纶、丙纶、腈纶等制成的无纺布。过滤器一般加工成抽屉式或袋式，并成组地安装在框架上，以便于更换。中效过滤器一般安装在风机之后系统的正压段。高效过滤器（或亚高效过滤器）主要阻挡粒径在0.5μm以上的尘粒。滤芯材料大多采用超细玻璃纤维和超细石棉纤维，过滤器一般加工成纸状，经多次折叠，以增加过滤面积。过滤面与初、中效过滤器配套使用，使空气在进入高效过滤器之前，先经过初、中效过滤器，以免大粒径的尘粒很快将其表面堵塞，影响其使用寿命。
空气过滤系统在工作运行过程中不断有粉尘被阻拦在滤材上，逐渐会形成阻塞，随后对实验动物设施内的多个环境因子造成不良影响，如进气量减少、换气次数减少、室内氨浓度上升、梯度压差改变等。因此，过滤材料必须及时更换。初效过滤材料一般2周至1个月更换一次，中效过滤材料3个月至半年更换一次，更换频度取决于单位面积滤材的进气强度及外环境空气中的粉尘含量等因素，初效和中效过滤材料换下后经水洗干燥后可重复使用。高效过滤器装在送风系统末端，通常l～1.5年更换一次。因为更换高效过滤器对动物室环境因素有很大影响，所以不宜过频更换。延长高效过滤器更换周期的措施是加大高效过滤器的面积以及提高初效和中效过滤器的质量，还应改善外环境清洁状况，降低粉尘含量。
（二）空调系统的维护
空调系统的正常运行是动物室内温度和湿度2个重要环境因素得到有效控制的保证。必须给以充分的重视。通常在每年机器较空闲的时候，对其进行检修。
空调系统最常发生问题的是热交换部件被灰尘和纤维状物质覆盖，使热交换率下降。要经常检查清洗热交换部件。如空调系统制冷能力下降，应考虑制冷剂不足而给予补充。
（三）灭菌系统维护
高压蒸气灭菌器是实验动物设施中最重要的物料灭菌器械，应随时注意其灭菌效果。最好每次灭菌都加指示剂，一次灭菌失败即可导致微生物污染，从而导致严重后果。
水的灭菌设施也很重要，尤其在水源微生物控制不严的情况下，要特别注意水灭菌系统的完好性。无菌水系统常见的问题是超滤膜击穿而除菌失败。此外，也有紫外光源损坏等，要经常检查维护，检查可用微生物培养法。系统正常运行时，水中应无微生物检出。
除了以上3个重要系统要经常维护外，还有许多其他维护工作要做，如传递渡槽中消毒液的检查、更换，传递窗紫外灯的更换维修，风淋室等设施的维护和管理等。任何一个环节的故障都可能导致设施环境质量下降，从而造成实验动物和动物实验不合格，损失可能是巨大的。
